Author: tcnhat
-
Production of functional dendritic cells from mouse bone marrow
Production of functional dendritic cells from mouse bone marrow
Abstract
Currently, immune cell-based therapies, particularly those that utilize dendritic cells (DCs), are a promising therapy approach for cancer treatment. Therefore, DC therapy is the focus of many studies in many laboratories worldwide that are developing novel cancer therapies. This study aimed to develop a reproducible procedure to produce functional DCs from mouse bone marrow for DC therapy research. Bone marrow was collected from mouse femur bones by flushing with buffered saline. These cells were used to isolate mononuclear cells (MNCs) by Ficoll gradient centrifugation. MNCs were cultured in RPMI 1640 medium supplemented with 20 ng/mL of IL-4 and 20 ng/mL of GMCSF to induce maturation of immature DCs. The results showed that this procedure induced cells exhibiting the DC phenotypes, such as the expression of CD40, CD80, and CD86, high phagocytic capacity, strong production of IL-12, and efficient stimulation of T-CD4 lymphocytes. These results suggest that this procedure can be used to produce functional DCs in future studies that use DCs for immune therapy.Keywords
Breast cancer stem cells, Dendritic cells, IL-12 mRNA, Immune therapy, Tumor lysates primed DCs.Full Text:
-
Production of Good Manufacturing Practice-Grade Human Umbilical Cord Blood-Derived Mesenchymal Stem
Production of Good Manufacturing Practice-Grade Human Umbilical Cord Blood-Derived Mesenchymal Stem Cells for Therapeutic Use
Abstract
Human umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cells (UCB-MSCs) are multipotent stem cells that can be differentiated into several specific cell types such as adipocytes, osteoblasts, and chondroblasts. They also were demonstrated to trans-differentiate into other cell lineages such as muscle cells and neurons. Thus, they are considered a promising stem cell source for therapeutic use. Here, we describe a method for production of good manufacturing practice-grade human UCB-MSCs for therapeutic use. The obtained UCB-MSCs are free of allogenous or xenogenous proteins. In addition, these MSCs could maintain the MSC phenotype in long-term culture.
- DOI
- 10.1007/7651_2014_125
- Series Title
- Methods in Molecular Biology
- Series Subtitle
- Methods and Protocols
- Series ISSN
- 1064-3745
- Publisher
- Humana Press
-
Ca điều trị bằng tế bào gốc iPS tự thân đầu tiên ở Nhật Bản
Một phụ nữ Nhật Bản là người đầu tiên nhận tế bào võng mạc được làm từ tế bào da của chính mình. Các nhà nghiên cứu tại Trung tâm Sinh học phát triển Viện RIKEN tại Nhật Bản phẫu thuật cấy ghép một tấm tế bào sắc tố võng mạc vào mắt của một người phụ nữ tuổi 70 năm vào thứ sáu vừa rồi.
Đây là lần đầu tiên, các tế bào iPS (induced pluripotent stem cells) được sử dụng để điều trị bệnh trên người. Quy trình được thực hiện bởi nhóm của Takahashi Masayo. Takahashi đã thu nhận tế bào da từ bệnh nhân và chuyển nó thành tế bào vạn năng cảm ứng iPS; sau đó iPS được biệt hoá thành các tế bào sắc tố võng mạc.
Bệnh nhân đã mất sức nhìn do sự thoái hóa điểm vàng, bởi vì các tế bào nội mô sắc tố võng mạc của bệnh nhân đã bị hư hỏng do phát triển quá mức của các mạch máu.
Các nhà khoa học tế bào gốc đang bắt đầu thử nghiệm phương pháp điều trị của họ trong các bệnh về mắt liên quan đến, bởi vì các bộ phận của mắt được bảo vệ khỏi hệ thống miễn dịch của cơ thể. Đó không phải là một vấn đề với các tế bào iPS, kể từ khi chúng được làm từ các tế bào da của bệnh nhân, nhưng nó là một cách an toàn bổ sung để đảm bảo điều trị an toàn và hy vọng hiệu quả.
Do nhiều người vẫn còn lo ngại về sự an toàn của tế bào gốc iPS khi được cấy ghép vào bệnh nhân. Cơ quan quản lý Thực phẩm và Dược phẩm Hoa Kỳ chưa chấp thuận một thử nghiệm liên quan đến tế bào iPS – cho đến nay, chỉ có các tế bào gốc được làm từ phôi thụ tinh ống nghiệm dư thừa đã được phê duyệt để điều trị thoái hóa điểm vàng. Một ủy ban gồm19 thành viên của Bộ Y tế Nhật Bản đã thông qua quy trình thử nghiệm bốn ngày trước, theo tự nhiên, sau khi thực hiện Takahashi, với sự giúp đỡ của Tiến sĩ Shinya Yamanaka của Đại học Kyoto, người đã chia sẻ giải Nobel năm 2012 cho khám phá iPS.
Các nhà khoa học tế bào gốc của Nhật Bản đang hy vọng cuộc phẫu thuật này thành công; lĩnh vực này đã được tranh cãi vì một bài báo được công bố công khai về một cách mới để làm các tế bào iPS bị rút lại trong bối cảnh các cáo buộc về gian lận trong nghiên cứu khoa học.
Nó không biết liệu các tế bào sẽ tiếp tục phát triển và hình thành các khối u bất thường hay không, hay chúng sẽ di chuyển đến các bộ phận khác của cơ thể. Nhưng bây giờ, bệnh nhân đầu tiên đã được ghép tế bào từ iPS, những câu hỏi – và nhiều hơn nữa, về hiệu quả của liệu pháp tế bào gốc – có thể được trả lời sớm.Theo Tạp chí Time
-
Improved differentiation of umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cells into insulin-produci
Improved differentiation of umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cells into insulin-producing cells by PDX-1 mRNA transfection
- Phuc Van Pham, ,
- Phuoc Thi-My Nguyen ,
- Anh Thai-Quynh Nguyen ,
- Vuong Minh Pham ,
- Anh Nguyen-Tu Bui ,
- Loan Thi-Tung Dang ,
- Khue Gia Nguyen ,
- Ngoc Kim Phan
Abstract
Numerous studies have sought to identify diabetes mellitus treatment strategies with fewer side effects. Mesenchymal stem cell (MSC) therapy was previously considered as a promising therapy; however, it requires the cells to be trans-differentiated into cells of the pancreatic-endocrine lineage before transplantation. Previous studies have shown that PDX-1 expression can facilitate MSC differentiation into insulin-producing cells (IPCs), but the methods employed to date use viral or DNA-based tools to express PDX-1, with the associated risks of insertional mutation and immunogenicity. Thus, this study aimed to establish a new method to induce PDX-1 expression in MSCs by mRNA transfection. MSCs were isolated from human umbilical cord blood and expanded in vitro, with stemness confirmed by surface markers and multipotentiality. MSCs were transfected with PDX-1 mRNA by nucleofection and chemically induced to differentiate into IPCs (combinatorial group). This IPC differentiation was then compared with that of untransfected chemically induced cells (inducer group) and uninduced cells (control group). We found that PDX-1 mRNA transfection significantly improved the differentiation of MSCs into IPCs, with 8.3±2.5% IPCs in the combinatorial group, 3.21±2.11% in the inducer group and 0% in the control. Cells in the combinatorial group also strongly expressed several genes related to beta cells (Pdx-1, Ngn3, Nkx6.1 and insulin) and could produce C-peptide in the cytoplasm and insulin in the supernatant, which was dependent on the extracellular glucose concentration. These results indicate that PDX-1 mRNA may offer a promising approach to produce safe IPCs for clinical diabetes mellitus treatment.
Abbreviations
- DMEM, Dulbecco’s modified eagle medium;
- GFP, green fluorescent protein;
- MNC, mononuclear cell;
- mRNA, messenger RNA;
- MSC, mesenchymal stem cell;
- IMDM, Iscove’s modified Dulbecco’s media;
- IPC, insulin producing cell;
- PBS, phosphate buffered saline
Keywords
- Mesenchymal stem cells;
- UCB-MSCs;
- Insulin producing cells;
- PDX-1;
- mRNA transfection
Fulltext at here:
http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0301468114000504
-
Flow Cytometry Data Analysis
Copyright: © 2015 |Pages: 9
DOI: 10.4018/978-1-4666-5888-2.ch539Flow Cytometry Data Analysis
Phuc Van Pham (VNU-HCM University of Science, Vietnam)
Background
What is FCM?
FCM analyses cellular characteristics in a manner similar to immunocytochemistry techniques. In immunocytochemistry, cells are evaluated while fixed to a slide, while FCM analyzes cells suspended in a solution. Therefore, the principle of FCM is similar to immunocytochemistry and the flow cytometer is similar to a microscope.
For microscope-based immunocytochemistry techniques each cell is observed and evaluated by human eyes. This presents several limitations. For example, cells are fixed in 2D, making some shape characteristics hard to evaluate. Additionally, the number of cells that can be observed and evaluated is restricted owing to the processing capacity limitations of human eyes and the number of cells on each slide. FCM does not possess these limitations. For FCM, cells are suspended in fluid to retain their three-dimensional structure while their continuous flow across an electronic optical detector increases the rate of data recording.
FCM Principle
How does a flow cytometer evaluate cell characteristics? Electronic detectors record signals from cells and convert them to computerized data, facilitating classification of cells into subgroups with similar characteristics. Signals are produced by focusing a beam of light (usually laser light) of a single wavelength on cells in a stream of fluid. This light is modified by cells and this modified light is recorded by detectors. Usually, there are three kinds of signals recorded: forward scatter (FSC), side scatter (SSC), and fluorescence. Therefore, a flow cytometer usually has at least three detectors collecting signals for FSC, SSC and fluorescence.
FSC correlates with cell volume, while SSC correlates with cellular content or granularity (such as shape of the nucleus, presence of cytoplasmic proteins). Hence, FSC gives information about cell size while SSC gives information about cell complexity. By combining these signals, cells that differ in their size and complexity can be recognized. A fluorescence signal only is created by fluorescent dyes when stimulated by the appropriate wavelength of light. In FCM, fluorescent dyes are typically used to stain nucleic acids or label antibodies that will identify specific proteins.
-
Thông báo tuyển dụng nhân sự 2014
ĐẠI HỌC QUỐC GIA TP. HỒ CHÍ MINH
TRƯỜNG ĐH KHOA HỌC TỰ NHIÊN
PTN NC & ƯD TẾ BÀO GỐC
Số: 31/TBG – 14
V/v Tuyển dụng cán bộ nghiên cứu/
kĩ thuật viên PTN
CỘNG HOÀ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM
Độc lập – Tự do – Hạnh phúc
Tp. Hồ Chí Minh, ngày 22 tháng 8 năm 2014
THÔNG BÁO
Căn cứ Quy chế tuyển dụng cán bộ viên chức của Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, ĐHQG Tp.HCM, PTN Nghiên cứu và Ứng dụng Tế bào gốc sẽ tuyển dụng cán bộ nghiên cứu/kĩ thuật viên theo kế họach sau đây:
I. ĐIỀU KIỆN DỰ XÉT TUYỂN
1. Đối tượng xét tuyển
Tất cả các đối tượng có nguyện vọng, đam mê nghiên cứu khoa học, đặc biệt trong lĩnh vực tế bào gốc, hỗ trợ sinh sản, y học tái tạo, y-sinh học và ung thư.
Số lượng cán bộ tuyển dụng (dự kiến): 05
2. Điều kiện tuyển dụng
– Tất cả các ứng viên tham gia dự tuyển phải có trình độ tối thiểu là Cử nhân/Kĩ sư Sinh học hay Công nghệ Sinh học và có sức khỏe tốt; ưu tiên ứng viên có trình độ sau Đại học (Thạc sĩ, Tiến sĩ);
– Tốt nghiệp Đại học hay Sau đại học ở các trường uy tín trong vào ngoài nước
– Độ tuổi :
– Người có bằng Đại học: tuổi ≤ 25
– Người có bằng Thạc sĩ: tuổi ≤ 30
– Người có bằng Tiến sĩ: tuổi ≤ 40
– Họat động cộng đồng: Đoàn viên TNCS, điểm rèn luyện đạt khá trở lên;
– Ngọai ngữ: Tiếng Anh: TOEFL ITP 450 trở lên (hoặc tương đương) đối với ứng viên có trình độ Đại học, TOEFL iBT 90 trở lên (hoặc tương đương) đối với ứng viên có trình độ Thạc sĩ và Tiến sĩ. Ứng viên tốt nghiệp hệ đào tạo bằng tiếng Anh tại các Trường trong và ngoài nước sẽ không cần chứng chỉ tiếng Anh.
3. Hình thức xét tuyển
– Hồ sơ: hồ sơ đầy đủ và đúng yêu cầu được tính hợp lệ;
– Phỏng vấn trực tiếp: các ứng viên có hồ sơ hợp lệ sẽ tham gia buổi phỏng vấn trực tiếp do Lãnh đạo PTN xét duyệt.
II. QUY TRÌNH XÉT TUYỂN
1. Hồ sơ xét tuyển
Ứng viên tham gia xét tuyển cần phải nộp đầy đủ các giấy tờ, văn bằng sau:
- Đơn xin tuyển dụng (tự viết);
- Lý lịch cá nhân có xác nhận của địa phương (theo mẫu);
- Bằng tốt nghiệp Cử nhân; Bảng điểm (bản sao có chứng thực) hoặc GCN tạm thời bản chính. Các trường hợp bằng tốt nghiệp và bảng điểm do nước ngoài cấp phải dịch sang tiếng Việt;
- Bằng tốt nghiệp Thạc sĩ, hoặc Tiến sĩ (bản sao có chứng thực) hoặc GCN tạm thời bản chính. Các trường hợp bằng tốt nghiệp do nước ngoài cấp phải dịch sang tiếng Việt;
- Chứng chỉ ngoại ngữ (hoặc tin học) theo yêu cầu trên;
- Giấy chứng nhận về hoạt động cộng đồng;
- Giấy chứng nhận đủ sức khỏe để làm việc;
Lưu ý: Hồ sơ xét tuyển không được trả lại sau khi tham gia xét tuyển. Người dự tuyển có thể nộp hồ sơ dạng văn bản trực tiếp tại PTN hay nộp trực tuyến tại hệ thống quản lí hồ sơ trực tuyến của PTN.
2. Thời gian nhận và xét duyệt hồ sơ
PTN sẽ nhận hồ sơ xét tuyển từ ngày ra thông báo này đến 17h00 ngày 20 tháng 9 năm 2014 .
Hồ sơ được nộp trực tiếp cho Thầy Phan Lữ Chính Nhân hoặc Cô Huỳnh Thúy Oanh tại PTN Nghiên cứu và Ứng dụng Tế bào gốc, 227 Nguyễn Văn Cừ, P.4, Q.5, Tp.HCM trong giờ hành chính (Sáng: 08h00-11h30, Chiều: 13h00-17h00, từ thứ 2 đến thứ 6); hoặc nộp trực tuyến tại Mục Hồ sơ Ứng tuyển tại website của PTN: http://www.vinastemcelllab.com/oms/signin.php
Hồ sơ được xét duyệt tính hợp lệ trong 10 ngày kể từ ngày kết thúc nhận hồ sơ.
3. Phỏng vấn
Tất cả các ứng viên có hồ sơ hợp lệ sẽ được mời tham dự phỏng vấn trực tiếp với Lãnh đạo PTN.
Thời gian phỏng vấn (dự kiến): 01/10/2014.
4. Công bố kết quả xét tuyển
Kết quả xét tuyển sẽ được thông báo trực tiếp đến ứng viên qua điện thoại, email và công bố trên website: www.vinastemcelllab.com.
Ngày công bố kết quả (dự kiến): 15/10/2014 Ngày nhận công việc: 01/11/2014.
TM. Trưởng phòng
P. Trưởng phòng
Phạm Văn Phúc
-
Danh mục tài liệu thư viện 2014
Bạn đọc bấm vào đây để download Danh mục tài liệu của Thư viện PTN Tế bào gốc.
-
Welcome to Progress in Stem Cell
Abstract
Welcome to the new open access journal Progress in Stem Cell, edited by Dr. Phuc Van Pham, and Dr. Ngoc Kim Phan, of Vietnam National University, Ho Chi Minh city, Vietnam. Progress in Stem Cell (ISSN 2199-4633) is the Open Access journal that acts as a forum for translational research into stem cell therapies. Progress in Stem Cell is scientific journal that overlays the study of cancer stem cells, stem cell therapy, stem-cell transplantation, human embryonic stem cells, neural stem cells, murine embryonic stem cells, adult stem cell… Progress in Stem Cell is a peer-reviewed journal that focuses on the areas of established and emerging concepts in stem cell research and their assorted disease therapies. It provides an opportunity to share the scientific information among the clinical & medical scientists and researchers. Progress in Stem Cell publishes the most complete and reliable source of information on the discoveries and current developments in the mode of editorial, original research, review, commentary, letter in all areas of stem cell from basic research to pre-clinical trials and clinical trials.
Keywords
Stem cell; Regenerative medicine; Adult srtem cells; Embryonic stem cellsFull Text:
